产琼胶酶南极菌微生物的筛选、鉴定、培养条件优化及酶学性质的研究

来源 :2012中国极地科学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xgw111
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  本文利用产琼胶酶微生物在琼脂平板上形成菌落并在卢戈氏染液作用下形成透明圈的现象,从南极菌种库396株菌中筛选获得59株产琼胶酶菌株,通过对这59株琼胶降解菌进行了16SrDNA序列测定和分析,得知其中有22株属于Pseudoalteromonas sp;有12株属于Psychrobacter sp.;有9株属于Colwellia sp.;有6株属于Moraxella sp.;有7株属于BAcillaceae sp.;有3株属于Rheinheimera sp..由此可知南极具有极为丰富的琼胶降解菌资源,并且南极产琼胶酶菌种有较大的多样性.由鉴定结果初步得出Pseudoalteromonas sp.菌属中所具有的琼胶降解菌较多.通过研究温度对琼胶酶酶活的影响,确定Pseudoalteromonas sp.菌属中十株高产酶菌株的最佳温度.比较十株菌在最佳温度下酶活的差异,确定用YDS-3和P11A-8(66)两株菌进行培养条件优化.测定不同氮源对P11A-8(66)和YDS-3酶活大小的影响,确定麸皮为最佳氮源.在基础发酵培养基中加入麸皮作为氮源,测定不同碳源对P11A-8(66)和YDS-3酶活的影响,确定YDS-3的最佳碳源为葡萄糖,而P11A-8(66)的最佳碳源为柠檬酸三钠.利用DNS法对反应温度、反应PH、金属离子对两株产琼胶酶菌P11A-8 (66)、QD224-2酶学性质的影响进行研究,研究表明,QD224-2最佳反应温度为40℃;最佳反应PH为8.0;MgCl2.6H2O,ZnSO4..7H2O,CaCl2,(NH4)2SO4对其酶活性有促进作用,其中铵离子最显著,SDS有抑制作用.P11 A-8(66)最佳反应温度为30℃;最佳反应PH为6.0;MgCl2.6H2O,ZnSO4.7H2O,CaCl2,SDS,(NH4)2SO4对其酶活性均有抑制作用.
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