实时荧光RT-R快速检测猪瘟病毒的研究与应用 Ⅱ.猪瘟及猪主要繁殖障碍性疾病双重荧光PCR鉴别检测方法的研究

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根据4种引起猪繁殖障碍的病原(猪瘟病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪细小病毒,猪伪狂犬病毒)的保守序列,设计了4组特异性的引物和4条探针。将这4种病原体分为两个反应体系进行检测,初步建立了同时检测这4种病原的双重荧光定量PCR方法。实验证明,双重荧光定量PCR方法检测CSFV的敏感性达2-8,而常规的nest-PCR的敏感性可达2-9;检测PRRSV的敏感性达2-2,nest-PCR的敏感性可达2-5;检测PRV的敏感性可达10-5,常规PCR方法可达10-4;检测PPV的敏感性达10-6,常规PCR方法可达10-4倍。同时,这种方法具有良好的特异性,可以达到快速鉴别诊断的目的。
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