【摘 要】
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以绿色巴夫藻为实验材料,以λTriplEx2为载体,利用SMART技术构建绿色巴夫藻cDNA文库;经测定文库的滴度为7.5x105pfu/ml,重组率为92﹪;利用PCR方法扩增插入片段的大小,其长度在5
【机 构】
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山东大学微生物技术国家重点实验室,济南,250100
【出 处】
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国家“863”计划资源环境技术领域第三届海洋生物高技术论坛
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以绿色巴夫藻为实验材料,以λTriplEx2为载体,利用SMART技术构建绿色巴夫藻cDNA文库;经测定文库的滴度为7.5x105pfu/ml,重组率为92﹪;利用PCR方法扩增插入片段的大小,其长度在500bp-1.5kb之间,表明该文库可用来筛选低丰度mRNA的cDNA克隆.对cDNA文库中的阳性克隆进行随机挑选,PCR检测插入片段的长度,从插入片段的5端单向测序,将测序结果与NCBI数据库进行Blast比对,初步获得了200个有研究价值的EST序列和cDNA克隆,为进一步研究绿色巴夫藻功能基因的表达奠定了基础.
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