一贯煎通过SDF-1/CXCR4路径促进骨髓间充质干细胞向肝分化的研究

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目的:探讨一贯煎通过SDF-1/CXCR4信号通路体外诱导骨髓间充质干细胞肝向分化的作用。方法:全骨髓贴壁培养法提取小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs),取P2代细胞用流式细胞术检测细胞表面标志物的表达,采用8种诱导方案对小鼠骨髓间充质干细胞进行诱导分化培养28天:A组:含有15%FBS的完全培养基的阴性对照组;B组:添加20ng/ml HGF;C组:添加50ng/ml SDF-1;D组:添加20ng/ml HGF+50ng/ml SDF-1;E组:添加20%一贯煎药物血清;F组:添加20%一贯煎药物血清+20ng/ml HGF;G组:添加20%一贯煎药物血清+50ng/ml SDF-1;H组:添加20%一贯煎药物血清+20ng/ml HGF+50ng/ml SDF-1。以7天为一个培养周期,即7天,14天,21天,28天四个时间点,采用免疫细胞化学、western blot及RT-PCR检测细胞白蛋白(ALB)和细胞角蛋白18(CK-18)的蛋白和mRNA表达情况。结果:HGF、SDF-1、一贯煎药物血清组均检测出ALB、CK-18的表达,在各组中的表达呈时间依赖性,且任意两者联用,ALB、CK-18的表达量均高于单独应用,HGF、SDF-1、一贯煎药物血清三者联用出现ALB、CK-18的时间最早且表达量最多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一贯煎能够诱导骨髓间充质干细胞的肝向分化,并且能够协同HGF、SDF-1促进BM-MSCs肝向分化作用。
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