【摘 要】
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羊膜组织来源丰富,近年来越来越受到人们的关注.本研究使用酶消化法从犬羊膜分离得到犬羊膜间充质干细胞(canine amniotic mesenchymal stem cells,cAMSCs),观察不同代次
【机 构】
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内蒙古农业大学兽医学院动物组织胚胎学与发育生物学实验室,内蒙古呼和浩特 010018
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羊膜组织来源丰富,近年来越来越受到人们的关注.本研究使用酶消化法从犬羊膜分离得到犬羊膜间充质干细胞(canine amniotic mesenchymal stem cells,cAMSCs),观察不同代次的细胞形态,并绘制了第3及第9代细胞的生长曲线,通过免疫荧光和RT-PCR鉴定了cAMSCs分泌和表达干细胞相关蛋白和基因,通过流式细胞术鉴定了cAMSCs细胞表面标志,通过成骨和成脂诱导分化探索了cAMSCs的定向分化能力.结果显示,cAMSCs呈长梭形,可在体外连续传代培养,免疫荧光检测显示cAMSCs表达Vimentin和SSEA-4,流式细胞术检测显示cAMSCs高表达CD29、CD49d和CD73,低表达CD34、CD45和HLA-DR.RT-PCR检测显示cAMSCs表达干细胞标志基因OCT4、SOX2和NANOG,体外可成功诱导为成骨和成脂细胞,并表达成骨细胞标志基因COL1A1和脂肪细胞标志基因LPL.结果表明,cAMSCs可在体外分离培养,分泌和表达干细胞相关蛋白和基因,并具有向成骨和成脂细胞分化的能力.本研究为兽医临床提供了可用的干细胞来源,并为犬再生医学研究奠定了实验基础.
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