论文部分内容阅读
目的:观察IEC-6细胞中RAS成分ACE2、AngⅡ、Ang(1-7)及Mas受体的表达及变化,明确其表达于IEC-6细胞中,探讨NSAIDs相关小肠损伤的可能机制.方法:将IEC-6细胞株二组分为.空白对照组:不予任何干预;模型组:采用800μM双氯芬酸钠干预24小时.倒置相差显微镜与透射电镜观察细胞形态及超微结构改变.RT-qPCR及Western Blot检测ACE2、AngⅡ、Mas的mRNA及蛋白表达;免疫荧光及ELISA法检测Ang(1-7)水平.结果:1.IEC-6细胞形态及超微结构改变:空白对照组细胞为均匀一致多边形,呈铺石状紧密相连,细胞间存在紧密连接,表面有微绒毛伸出,线粒体丰富,嵴清晰可见;模型组细胞损伤较明显,部分呈纺锤形,细胞表面微绒毛脱落,线粒体肿胀,嵴变短减少,胞质内可见较多空泡.2.IEC-6细胞ACE2-mRNA、AngⅡ-mRNA及Mas-mRNA表达:模型组较空白对照组ACE2-mRNA表达无明显差异(P>0.05);AngⅡ-mRNA较空白对照组显著上调(P<0.01);Mas-mRNA表达较空白对照组明显上升(P<0.01).3.IEC-6细胞ACE2、AngⅡ及Mas蛋白表达:两组ACE2蛋白表达无明显差异(P>0.05);模型组Mas蛋白表达较空白对照组明显增加(P<0.01);AngⅡ蛋白表达较空白对照组显著增高(P均<0.01).4.IEC-6细胞中Ang(1-7)表达:免疫荧光检测到Ang(1-7)表达于胞浆中,模型组荧光亮度高于空白对照组.ELISA法检测到模型组相对于空白对照组细胞上清液中Ang(1-7)表达量明显增加(P<0.05).结论:1.IEC-6细胞存在RAS中ACE2、AngⅡ、Ang(1-7)及Mas的表达.2.ACE2-Ang(1-7)-Mas轴在双氯芬酸钠相关IEC-6细胞损伤过程中的变化,提示RAS参与了NSAIDs相关小肠损伤.