邻近连接诱导的TdT酶扩增合成银纳米簇检测PDGF-BB

来源 :第十一届全国化学生物学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:study1129
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  富胞嘧啶寡核苷酸包封的银纳米簇(DNA-AgNCs)作为一种荧光纳米材料被广泛应用在生物分析领域,而TdT 聚合形成的富含C 碱基的长链DNA 可以作为合成AgNCs 的模板.因此,我们利用这种富含C 碱基的长链DNA 来包裹AgNCs 形成DNA-AgNCs 的方法进行靶向检测,且该长链DNA 由末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)以无模板方式聚合而成.在此方法中,基于末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)-聚合的富含胞嘧啶的长链DNA-AgNCs 和核酸外切酶Ⅲ(Exo Ⅲ)-辅助的信号放大策略,报道了一种以血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)作为靶标的无标记荧光检测平台.该方案中,适体探针S1 可以与PDGF-BB结合,使其首尾靠近并触发邻近连接效应,然后与探针S2 进行碱基互补配对形成双链复合物,同时Exo Ⅲ 会切割探针S2,从而释放3OH 末端短链DNA,S1 进行下一循环.当加入TdT 和三磷酸脱氧胞苷(dCTP)后,TdT 介导合成富含胞嘧啶的长链DNA,并通过AgNO3和NaBH4 化学还原反应,形成富胞嘧啶寡核苷酸包封的银纳米簇以实现无标记的PDGF-BB检测.这种检测PDGF-BB 的方法灵敏度高、成本低,检测限低至0.3 pM.这种新颖的TdT聚合长链DNA 合成银纳米簇的方法,可作为多功能和有效的传感平台来检测相关活性物质.
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