痛泻要方对RIN-m细胞TRAP1表达和5-HT分泌的影响

来源 :中华中医药学会脾胃病分会第二十八届全国脾胃病学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haobs
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  目的:研究显示痛泻要方能够降低IBS模型大鼠的内脏高敏感性.5-HT是导致内脏高敏感性的一个重要神经内分泌递质.TRAP1激活可以引起5-HT的分泌.本研究主要探讨痛泻药方对RIN-m细胞TRAP1表达和5-HT分泌的影响.方法:体外培养RIN-m细胞分为5组:阴性对照组(加入不含药物的RPMI-1640完全培养基)、阳性对照组(加入含浓度为0.5μg/ml TRAP1拮抗剂钌红的RPMI-1640完全培养基)、痛泻药方低浓度组、中浓度组和高浓度组.痛泻要方各组分别加入含0.05%、0.1%和0.5%中药的RPMI-1640完全培养基.在静息与激活状态(加入0.1μM TRAP1激动剂异硫氰酸丙烯酯)下,分别培养48小时与72小时,收集各组上清液及细胞,用HPLC法检测5-HT浓度,用real-time PCR和Westernblotting法检测TRPA1mRNA和蛋白的表达.结果:(1)在静息状态下,无论是培养48小时还是72小时,TRPA1的mRNA和蛋白的表达与5-HT分泌呈正相关.在激活状态下,培养48小时,TRPA1的mRNA和蛋白的表达与5-HT分泌无相关性;培养72小时,TRPA1的mRNA和蛋白的表达与5-HT分泌呈正相关.(2)无论是在静息状态还是在激活状态下,无论是培养48小时还是72小时,痛泻要方各组的5-HT含量均明显低于阴性对照组,高于阳性对照组(P<0.05),而且呈剂量相关性.(3)无论是在静息状态还是在激活状态下,无论是培养48小时还是72小时,痛泻要方各组的TRPA1的mRNA和蛋白表达均明显低于阴性对照组,高于阳性对照组(P<0.05),而且呈剂量相关性.结论:TRPA1的表达与5-HT的分泌相关,痛泻药方能够通过抑制TRPA1的表达来减少5-HT的分泌,而且这种作用存在剂量相关性.
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