【摘 要】
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目的:构建人偏肺病毒基因组亚克隆,为下一步全基因克隆及更全面深入地了解人偏肺病毒奠定基础。方法:根据GenBank中已知的hMPV全基因序列设计引物,运用长片段RT-PCR技术扩增
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目的:构建人偏肺病毒基因组亚克隆,为下一步全基因克隆及更全面深入地了解人偏肺病毒奠定基础。方法:根据GenBank中已知的hMPV全基因序列设计引物,运用长片段RT-PCR技术扩增目的片段,切割含目的条带的凝胶进行纯化,并将目的片段连接到PJET1.2/blunt克隆载体,转化感受态细胞TOP10,经含氨苄青霉素的抗生素平板筛选,得到阳性克隆,提取质粒,最后对重组质粒进行PCR鉴定和测序鉴定。结果:所获的阳性条带经PCR和测序鉴定证实为hMPV部分片段。结论:成功构建了hMPV基因组亚克隆,可进一步用于全基因克隆。
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