东阳光鲜冬虫夏草水提物通过调节巨噬细胞表型抑制乳腺癌细胞的生长

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背景:以往,国内外已有较多的文献报道了冬虫夏草具有抗肿瘤作用,但都是在体外2D肿瘤模型和动物模型中进行的,而且缺乏通过免疫调节作用杀伤肿瘤细胞的直接证据。目的:研究东阳光鲜冬虫夏草水提物是否通过调节巨噬细胞表型从而发挥抗肿瘤作用。方法:采用巨噬细胞和肿瘤细胞3D共培养模型,模拟体内真实的肿瘤微环境,评价东阳光鲜冬虫夏草水提物的抗肿瘤作用。另外,采用IL-4诱导的腹腔巨噬细胞向M2型分化模型,评价了东阳光鲜冬虫夏草水提物对巨噬细胞的表型分化的影响。结果:在乳腺癌4T1细胞单独3D肿瘤模型中,东阳光鲜冬虫夏草水提物在0.0016-0.40 mg/ml的浓度范围内对4T1细胞的生长无明显的抑制作用(P>0.05)。与4T1细胞单独培养相比,4T1细胞和巨噬细胞以1:5的比例混合3D共培养后,可明显促进4T1的增殖(P<0.05)。在4T1细胞和巨噬细胞以1:5的比例混合3D共培养下,与溶媒对照组比较,东阳光鲜冬虫夏草水提物(0.40和0.10 mg/m1)对4T1细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),且具有浓度依赖性;与4T1细胞和巨噬细胞共培养比较,加入20 ng/ml的IL-4后能明显促进4T1细胞的增殖(P<0.05)。在4T1细胞和IL-4诱导的巨噬细胞共培养的条件下,与溶媒对照组比较,东阳光鲜冬虫夏草水提物(0.40、0.10和0.025 mg/ml)对4T1细胞的增殖具有明显的抑制作用,且具有浓度依赖性(P<0.01或P<0.05)。与溶媒组比较,加入IL-4后小鼠腹腔巨噬细胞分泌的M1型细胞因子TNF-α量降低约59%;与IL-4诱导的巨噬细胞相比,东阳光鲜冬虫夏草水提物干预后,巨噬细胞分泌的TNF-α量出现浓度依赖性的升高,低、中、高3个浓度(0.025、0.10和0.40 mg/ml)分别增加3.1倍、6.8倍和5.6倍。结论:东阳光鲜冬虫夏草水提物对乳腺癌4T1细胞无直接的抑制作用,但可通过调节巨噬细胞表型,抑制巨噬细胞向M2型分化,促进巨噬细胞向M1型分化,从而发挥抗肿瘤作用。
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