【摘 要】
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目的 本研究旨在探讨eIF6是否能够抑制TGF-β1诱导的皮肤来源肌成纤维细胞分化,以及该负性调控作用是否通过抑制TGF-β1/Smad途径信号转导及调控该途径下游关键分子表达及活化状态介导.方法 原代培养新生小鼠(eIF6+/-及其同窝野生型小鼠)皮肤来源成纤维细胞,TGF-β1(5 ng/mL)和/或SB431542 (30μM)处理经同步化的第3代成纤维细胞,western blot方法检测
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038
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目的 本研究旨在探讨eIF6是否能够抑制TGF-β1诱导的皮肤来源肌成纤维细胞分化,以及该负性调控作用是否通过抑制TGF-β1/Smad途径信号转导及调控该途径下游关键分子表达及活化状态介导.方法 原代培养新生小鼠(eIF6+/-及其同窝野生型小鼠)皮肤来源成纤维细胞,TGF-β1(5 ng/mL)和/或SB431542 (30μM)处理经同步化的第3代成纤维细胞,western blot方法检测P-Smad2、Smad2、P-Smad3、 Smad3、抑制性Smad7以及α-SMA的表达,流式细胞技术检测TGF-β1Ⅰ型受体表达及Real Time PCR检测Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)mRNA的表达.结果 eIF6表达下降可显著增加TGF-β 1诱导的α-SMA及Ⅰ型胶原的表达,同时我们发现eIF6表达下降可上调P-Smad2及P-Smad3表达、下调抑制性Smad7表达,然而TGF-β 1 Ⅰ型受体表达没有显著影响.Smad信号通路阻断剂SB431542处理细胞后可抑制TGF-β 1诱导的α-SMA、Ⅰ型胶原的表达及Smad信号通路活化.结论 研究结果提示eIF6可部分通过TGF-β/Smad信号通路抑制TGF-β 1诱导的α-SMA、Ⅰ型胶原的表达从而肌成纤维细胞分化.eIF6可能成为抑制肌成纤维细胞分化、控制纤维化形成的新靶点.
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