目的 利用RNA干扰技术对胎盘早剥(placental abruption,PA)和正常出生的新生儿脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs)组织因子(tissue factor,TF)的表达进行干预.方法 收集2008年11月至2010年2月胎盘早剥(placental abruption,PA)产妇分娩胎儿(足月或早产不限)6例的脐带(PA组)及6例同期正常产妇分娩胎儿的脐带(正常对照组).构建RNA干扰TF基因表达载体及RNA 干扰沉默PA胎儿HUVECs TF基因表达.两组分别进行以下处理:(1)空白未干扰对照;(2)假干扰对照;(3) RNA干扰TF基因表达.观察处理后HUVECs在基因沉默前后的mRNA表达、TF蛋白水平免疫荧光检测的变化.结果 将构建的pENTRTM/U6-TF-shRNA转染到正常对照组和PA组,正常对照组HUVECs在转染后TF mRNA水平较空白对照的0.657±0.097下降至0.220±0.030; PA组则由1.323±0.323下降至0.207±0.150.与正常对照组比较,TF mRNA表达在PA组空白对照处理(1.323±0.323 vs0.657±0.097,P=0.023)、假干扰处理(1.057 ±0.178 vs 0.540±0.079,P =0.01)后差异均有统计学意义,而RNA干扰处理后正常对照组和PA组之间TFmRNA的表达差异无统计学意义(0.220 ±0.030 vs 0.207 ±0.150,P＞0.05).在正常对照组及PA组内,各处理间差异均有统计学意义(F=27.657,P=0.001;F=19.299,p=0.002).结论 构建的pENTRTM/U6-TF-shRNA成功转染到HUVECs,显著抑制PA 产妇胎儿HUVECs中TF的表达。
组织因子基因沉默对胎盘早剥人脐静脉内皮细胞的影响
【摘 要】
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目的 利用RNA干扰技术对胎盘早剥(placental abruption,PA)和正常出生的新生儿脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs)组织因子(tissue factor,TF)的表达进行干预.方法 收集2008年11月至2010年2月胎盘早剥(placental abruption,PA)产妇分娩胎儿(足月或早产不限)6例的
【机 构】
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510080广州,中山大学附属第一医院PICU,510000广州市妇女儿童医学中心检验科,510080广州,中山大学附属第一医院PICU,100700北京,北京军区总医院附属八一儿童医院
【出 处】
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中国小儿急救医学
【发表日期】
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2012年19期
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