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背景 miRNA实时定量PCR芯片基于Exiqon公司的miRCURY LNATMUniversal RT microRNA PCR平台,芯片结合了采用LNATM专利技术的引物和独特的Universal RT反应,实现对microRNA的准确定量检测,即使在总RNA量较低的样本,如血清/血浆中,也可以获得高质量的microRNA检测结果.目的检测类风湿关节炎(RA)患者和正常对照人群血浆中的miRNAs表达谱的差异,探讨miRNAs在RA发病中的作用.方法6例RA患者,其中女性5例,男性1例,年龄48.67±11.27岁,均符合1987年美国风湿病学会修订的RA诊断标准；3例对照人群来源于我院正常体检者,排除高血压、心脏病、糖尿病及自身免疫性疾病,其中女性2例,男性1例,年龄44.67±8.62岁.先进行RNA逆转录合成cDNA,然后在384孔板中利用miRNA实时定量PCR芯片进行Real-time PCR扩增和溶解曲线分析.获得原始的Ct值,取5个看家基因(miR-93,miR-425,miR-191,miR-423,miR-103a)的Ct值的均值,将miRNAs的Ct值减去看家基因的Ct值作为△Ct值.计算标准化后的2-△C1值表示miRNA的相对表达含量,RA患者的miRNA的表达平均2-△Ct值除以正常对照人群表达的平均2-△Ct值为miRNA的表达倍数变化.结果miRCURY LNATM Universal RT microRNA PCR芯片一共有180个人类来源的miRNAs,共筛选出25个差异表达的miRNAs,其中在RA组中高表达的有5个,低表达的有20个.6例RA患者根据临床特征分为两组：早期RA组(3例)和中晚期RA组(3例),早期RA组与正常对照组比较,上调的有两个miRNA(miR-133a和miR-375),下调的有11个；晚期RA组与早期RA组比较,上调的有1个miRNA (miR-92b),下调的有13个.结论 RA患者血浆中有多个miRNAs异常表达,可能参与RA的发病.