【摘 要】
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目的：建立柱上堆积高效毛细管电泳法同时拆分细胞内氨甲蝶呤对映体及其六种代谢产物MTXPG的方法。方法：采用高效毛细管电泳技术，以PH7.475 mmol／L。的磷酸盐缓冲液作为分离介
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目的：建立柱上堆积高效毛细管电泳法同时拆分细胞内氨甲蝶呤对映体及其六种代谢产物MTXPG的方法。方法：采用高效毛细管电泳技术，以PH7.475 mmol／L。的磷酸盐缓冲液作为分离介质，用水和乙腈(V/V,1：1)作溶剂重组残留样品的的方法进行柱上样本堆积，0．5psi压力进样时间50s，在分离电压28kV，检测波长300nm条件下对MTX对映体和MTXPG进行分离。在此基础上，检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG的含量。结果：通过不断改变分离缓冲液中异丙醇(5%,8%,10%,V/V)和hp-β-CD浓度(20,25,30 mmol/L)发现在含8%的异丙醇、25mmo1/L hp-β-CD的缓冲液条件下，30min内实现7种组分的完全分离。用水和乙睛(V/V,1：1)作溶剂重组残留样品进行柱上样本堆积的方法可实现检测灵敏度提高10倍。结论：建立柱上样本堆积高效毛细管电泳法可同时检测细胞内MTX对映体及其代谢产物MTXPG。该方法具有高效、快速、简单、超高灵敏度的特点。
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