抗肝纤维化中药复方血清药理学研究方法与应用

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分离培养大鼠肝细胞及星状细胞。扶正化瘀方灌胃正常大鼠制备血清,以不同整体动物口服剂量、药物体内作用时间(取血时间)以及体外不同药物血清浓度温育大鼠肝细胞及星状细胞;或者扶正化瘀方冻干为粉末直接添加于培养细胞。通过观察细胞增殖与细胞活力等功能变化,研究不同条件的药物血清对细胞功能的影响,以建立抗肝纤维化的体外给药方法-血清药理学(含药血清药理方法)方法,并将该方药物血清与拆方药物血清作用于培养细胞,观察其对细胞胶原生成与转化生长因子表达的影响等,研究扶正化瘀方的细胞与分子药理机制与组方原理。结果表明选用与细胞来源同种的动物,间隔2h二次给药再1h后取血,并56℃、30min灭活的含药血清能较好地用于抗肝纤维化的体外药理试验。该方药物血清明显抑制不同原因激活的星状细胞增殖,抑制其胶原基因表达与蛋白生成,抑制TGF-β1的基因表达与分泌,阻止细胞的自分泌活化。促进损伤肝细胞功能的功能修复,抑制其异常细胞增殖与胶原生成。提示药物血清这些作用是扶正化瘀方抗肝纤维化的主要细胞分子药理机制。扶正药抑制胶原生成作用较强,化瘀药抑制细胞增殖与活化作用较强,而全方综合效果较好,说明扶正化瘀方作为一个组方整体,具有多位点、多环节的作用特点。
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