目的:旨在通过对ORFV感染宿主细胞胎羊鼻甲骨细胞(OFTu)的自噬标志性分子LC3Ⅱ的转录和表达情况进行检测,研究自噬对ORFV复制增殖的影响,阐明羊传染性脓疱病的分子发生机理。方法:将ORFV感染后12h、24h、36h、48h的OFTu细胞经戊二醛进行固定,制作相应的超薄切片,观察是否形成有自噬体;同时利用间接免疫荧光对细胞内源性LC3Ⅱ的分布变化进行检测以观察自噬体的形成情况。利用Western Blotting检测ORFV感染不同时间(12h、24h、36h、48h、72h、84h和96h)OFTu细胞中LC3型别的转换,评估自噬发生的过程。结果:超微结构观察发现,在感染后36 h可观察到自噬体形成;间接免疫荧光观察结果显示,在未感染ORFV的细胞中LC3呈弥散分布,而LC3在感染ORFV的细胞中发生点状聚集,这表明ORFV感染诱导细胞发生了自噬;Western Blotting结果发现染毒细胞LC3的型别转换逐渐增加,阴性对照组未见明显变化。以上结果表明ORFV可以诱导OFTu细胞发生自噬,目前正在进行细胞自噬的发生对ORFV复制影响的研究。结论:本试验通过研究自噬对ORFV复制增殖的影响,为进一步探索与ORFV与宿主细胞互作等的相关研究提供理论基础,并为ORFV致病机制的阐明及寻找有效的抗病毒手段奠定基础。