【摘 要】
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目的：检测microRNA-218(miR-218)在人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞(CCRF-CEM)中的表达情况,和对CCRF-CEM细胞生物学特性的影响,并观察miR-218对靶基因c-kit表达的影响,为人白
【机 构】
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南通大学附属医院儿科 226000
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目的：检测microRNA-218(miR-218)在人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞(CCRF-CEM)中的表达情况,和对CCRF-CEM细胞生物学特性的影响,并观察miR-218对靶基因c-kit表达的影响,为人白血病治疗提供新方法和新策略.
方法：利用定量实时PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测miR-218在正常人外周血T淋巴细胞和CCRF-CEM中的表达情况.在CCRF-CEM细胞中转染miR-218mimic后48h,qRT-PCR检测CCRF-CEM细胞中miR-218表达变化;MTT检测miR-218对CCRF-CEM细胞活力的影响.流式细胞仪分析miR-218对细胞CCRF-CEM的细胞周期和凋亡的影响.利用荧光报告酶系统检验c-kit是miR-218调控靶基因,并采用Western blot方法检测miR-218对CCRF-CEM细胞中KIT蛋白表达的影响.
结果：qRT-PCR检测结果显示:与正常人外周血T淋巴细胞相比，miR-218在CCRF-CEM细胞系中的表达显著下降(P<0.01)。与对照组相比，在CCRF-CEM中转染miR-218mimic48h后，细胞中miR-218的表达显著上升(P<0.01)。MTT结果显示:在CCRF-CEM细胞中过表达miR-218后，细胞活力显著下降(P<0.05)。
结论：miR-218在人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞(CCRF-CEM)中表达下调，miR-218可负性调节KIT蛋白的表达，并抑制CCRF-CEM细胞增殖，促进凋亡。增强miR-218表达的治疗策略有望使白血病患者受益。
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