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AcrAB蛋白是大肠杆菌最主要的主动外排系统，可完成对多种药物的外输，其中连接蛋白AcrA连接内膜转运子AcrB和外膜孔道TolC。从大肠杆菌AcrA的编码序列中设计引物，以大肠杆菌基因组为模板，扩增出AcrA基因中约691bp的cDNA片段，将所得片段与pMD-18T载体连接，转化到DH5。大肠杆菌中，成功地筛选到阳性克隆，其质粒测序结果与文献报道一致。从阳性克隆中提取质粒，经HindⅢ和BamH Ⅰ酶解,回收691bp的目的片段，定向克隆到Pet-28a表达载体中，提取质粒，再次转化到BL21(DE3)中，成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌，通过SDS-PAGE检测出AcrA部分基因的表达。用侧带法纯化AcrA部分基因的原核表达产物，将纯化的表达蛋白与弗氏佐剂乳化后(目的蛋白终浓度为1mg/mL)，作为免疫原按Iml/只，次的剂量，免疫獭兔三次，每次间隔14d。首免采取多点皮下注射，加强免疫采取多点肌肉注射。加强免疫后每隔7d耳静脉采血一次，用ELASA直至检出理想的抗体效价。AcrA抗体的成功制各为采用Western-blotting法检测大肠杆菌AcrAB外输泵的表达水平奠定了基础。