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本研究在狂犬病毒弱毒株HEP-Flury株全基因组3-N-P-M-G-L5的伪基因区域(G与L之间)，插入一个G基因，构建了携带双G基因的全长感染性克隆，其与辅助质粒共转染BHK-21细胞，成功获得狂犬病毒HEP-dG嵌合病毒，盲传十代，用荧光抗体和RT-PCR鉴定，该嵌合病毒在BHK一21细胞中稳定生长；狂犬病毒Hep-Flury株是日本等多个国家使用的常规疫苗株，在控制上述国家的狂犬病疫情中发挥了重要的作用该毒株经驯化后，已完全适应BHK-21细胞，能在该细胞上大量稳定增殖。在BHK-21细胞中培养4d，病毒滴度可达1.O×108～1.O×1109FFU/0.1mL，比亲代毒株Hep-Flury及其它狂犬病毒株高100-1000倍。以Hep－Flury株为基础改造的新型狂犬病毒Hep－dG株，具有更好的免疫原性。以该毒株制成的油乳剂灭活疫苗，分别免疫小鼠和犬，均能在免疫后14d产生高水平的中和抗体，与同类进口狂犬病灭活疫苗相比，抗体水平高1倍多。经改造后。该毒株的毒力比亲代株还弱，仅能引起未成年小鼠发病死亡，对成鼠无致病性。结果表明，Hep-dG株和rHey－Flury株比较，其致病性降低、免疫原性提高。因此，该研究为开发新型基因工程疫苗奠定了基础。