人端粒酶逆转录酶基因修饰的大鼠内皮祖细胞治疗糖尿病ED

来源 :第十次全国中西医结合男科学术大会暨第六届广西中医、中西医结合男科学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wxm2000
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  目的 勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)是糖尿病患者最常见的并发症之一.目前对糖尿病ED治疗的疗效欠佳.干细胞治疗是近年来兴起的新的治疗糖尿病ED的方法,大量实验已经证实其效果.本研采用人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)基因修饰的大鼠内皮祖细胞(EPCs)治疗糖尿病ED大鼠,并对其治疗机制进行探索.方法 体外分离并培养大鼠EPCs,采用hTERT转染获取EPCs-hTERT.研究EPCs-hTERT旁分泌生长因子和氧化应激下抗凋亡的作用.将30只SD雄性大鼠分为5组:糖尿病ED组,采用EPCs治疗的糖尿病ED组,采用EPCs-control治疗的糖尿病ED组,采用EPCs-hTERT治疗的糖尿病ED组,正常对照组.利用腹腔内注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病模型,并进一步采用阿扑吗啡(apomorphine,APO)实验筛选糖尿病ED大鼠.阴茎海绵体内注射EPCs两周后,电刺激海绵体检测每组的勃起功能,并计算海绵体内压(intracavernosal pressure,ICP)与平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)的比值.采用ELISA法检测阴茎海绵体内生长因子含量,免疫荧光法检测阴茎组织内移植的EPCs的存活量及内皮/平滑肌的含量.结果 EPCs-hTERT可长时间稳定表达hTERT基因的mRNA及蛋白.EPCs-hTERT旁分泌更多VEGF、HGF和bFGF.与EPCs比较,EPCs-hTERT在氧化应激的环境下的凋亡减少.体内检测ICP/MAP值显著高于糖尿病ED组和采用EPCs治疗的糖尿病ED组.阴茎海绵体内的生长因子含量显著增高,并且免疫荧光检测发现EPCs-hTERT在阴茎组织内的存活量明显多于EPCs或EPCs-control治疗组.结论 EPCs-hTERT可显著改善糖尿病ED大鼠的勃起功能,其机制可能与其旁分泌生长因子和抵抗氧化应激能力增高有关.
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