慢病毒介导的Isl1基因在人骨髓间充质干细胞中的表达

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<正>目的应用慢病毒介导的基因转导技术,在人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSC)中外源性表达Isl1基因,研究转导后不同时间Isl1基因的mRNA和蛋白的表达情况,并检测其下游基因Nkx2.5,Flk-1的表达情况。方法通过多位点Gateway载体构建技术构建2K7puro/EF1α-Isl1慢病毒表达载体(即是由EF1α启动子启动Isl1基因的表达)。利用包装细胞293FT细胞获得慢病毒,转导至人骨髓间充质干细胞,利用嘌呤霉素抗性筛选出Isl1阳性细胞。应
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