鲍曼不动杆菌体外诱导耐药模型的构建及其耐药机制的初步研究

来源 :2012年中华医学会全国临床微生物学术交流大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flycondor
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  目的:通过多种抗菌药物体外诱导构建鲍曼不动杆菌耐药的体外模型,探讨临床分离的鲍曼不动杆菌敏感菌株在诱导条件下对常见抗菌药物的耐药情况和耐药机制研究,指导临床合理用药.方法:采用常用抗菌药物(FEP、CIP、LEV、AK、TZP、SCF、IPM)分别对16株鲍曼不动杆菌进行体外多步诱导耐药;采用琼脂平板二倍稀释法测定诱导前后抗菌药物对鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC);用随机扩增多态性DNA法(RAPD)技术对比分析诱导前后菌株的基因型;利用聚合酶链反应(PCR)对β-内酰胺酶基因OXA-23、OXA-24、AmpC、TEM-1、IMP,氨基糖苷类耐药基因aac(3)-I、aac(6′)-I、ant(3″)-I、aph(3(’))-Via,16S rRNA甲基化基因armA、rmtA、rmtB,喹诺酮类基因parC、gyrA以及主动外排基因adeB进行扩增及对比分析诱导前后鲍曼不动杆菌耐药基因的携带情况,以及与基因型和耐药性的关系.结果:16株鲍曼不动杆菌敏感菌株经体外诱导后15株产生了诱导耐药菌株(此15株菌株诱导后共产生了71株耐药菌株).16株敏感菌株经FEP、CIP、LEV、AK、TZP、SCF、IPM体外诱导后形成耐药菌株的概率分别为81.3%,75.0%,68.8%,68.8%,56.3%,50.0%,43.8%,诱导后菌株MIC值升高了8~128倍.AP2基因分型结果显示,诱导后菌株基因型发生了明显的变化.PCR结果显示,鲍曼不动杆菌体外诱导前后菌株耐药基因rmtA、OXA-24、TEM-1和IMP的携带率比较差异无统计学意义(P>0.05).而aac(3)-I、aac(6(’))-1、ant(3″)-I,OXA-23、AmpC,armA、rmtB、aph(3)-Via和adeB的诱导前后的携带率分别为12.5%、18.8%、6.3%、18.8%、50.0%、12.5%、12.5%、6.3% 18.8%和54.5%、63.6%、81.8%、64.9%、91.9%、90.9%、54.5%、54.5%和78.6%,经统计学分析,具有统计学意义(P<0.05).特别是诱导前后主动外排基因adeB携带率经统计学分析,x2值高达20.257,具极显著性差异(P<0.01).结论:经体外多步诱导法成功构建了鲍曼不动杆菌诱导耐药模型,adeB主动外排作用可能是鲍曼不动杆菌体外诱导耐药的最主要机制.
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