变异链球菌管家基因荧光蛋白表达载体的构建

来源 :全国第八次牙体牙髓病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong429
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  目的:构建由管家基因启动子启动的红色荧光蛋白报告基因穿梭表达载体,利用红色荧光蛋白发光性及强度与启动子表达的关联性,为研究管家基因启动子表达情况及变异链球菌致龋基因表达与致龋生物膜环境关系提供基础。方法: 以变异链球菌(UA159)基因组为模板,设计合成引物,PCR获取并验证目的片段;构建由目的基因启动子启动的原核表达载体pRred;通过酶切重组,构建以管家基因启动子启动的红色荧光蛋白肠杆菌-链球菌重组载体pLRred;;并通过酶切、转化宿主变异链球菌(UA159)验证重组载体。结果:测序证实扩增片段为目的序列,对含有重组载体于宿主细胞进行荧光观测结果提示,重组载体pLRred的成功构建。结论:本课题中构建的由管家基因启动子启动的红色荧光蛋白穿梭表达载体可应用于基因表达的研究。
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