人Cu/Zn-SOD在酵母系统中的表达

来源 :中国生物化学与分子生物学学会第六届工业生化学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sym1989

【摘要】

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甲醇酵母Pichia pastoris是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人Cu/Zn-SOD基因克隆到酵母整合型质粒载体pPIC3.5K，经转华his4缺陷型酵母GS115，用MD培养基及PCR方法筛选阳性

【作者】

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施慧娟[1]陈哲宇[2]李明峰[2]贺华君[3]孙建新[2]何志勇[2]魏东芝[3]吴祥甫[2]袁勤生[3]

【机构】

：

华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室中国科学院上海生物化学研究所

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学学会第六届工业生化学术会议

【发表日期】

：

1999年期

【关键词】

：

胞内表达酵母系统

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甲醇酵母Pichia pastoris是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人Cu/Zn-SOD基因克隆到酵母整合型质粒载体pPIC3.5K，经转华his4缺陷型酵母GS115，用MD培养基及PCR方法筛选阳性转化子，并用含G418的YPD培养基筛选多拷贝转化子，经甲醇诱导表达，SDS-PAGE和蛋白质印迹杂交结果证实了表达产物为重组的人Cu/Zn-SOD，经计算机扫描分析，表达量占酵母可溶性蛋白的14℅，所表达的人Cu/Zn-SOD比活可达77U/mg蛋白。

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