人hole基因的克隆和序列分析

来源 :第九届中南地区实验动物科技交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qidezhong
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目的:克隆人的hole基因,并进行生物信息学分析。 方法:以胚胎心脏cDNA文库为模板,进行PCR扩增得到hole基因的ORF。并进行亚克隆入PMD18-T 载体,转化大肠杆菌DH5α,用Xho1进行酶切和测序鉴定阳性克隆。利用Internet和GeneBank数据库对测序结果正确的hole基因进行生物信息学分析。 结果:克隆了hole基因,测序结果正确;生物信息学分析表明,hole基因开放读码为960bp,编码319个氨基酸;同源性分析表明,人的hole与鼠、鸡hole蛋白具有高度同源性。多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其心脏表达最高。 结论:成功克隆hole基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础。
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目的:观察六月青总皂苷(the terpenoids of Liuyueqing,TLYQ)体内抗鸭乙型肝炎病毒(duck hepatitis B virus,DHBV)的作用。方法:将DHBV DNA阳性麻鸭随机分为六月青总皂苷大、中、小剂量治疗组、拉米夫定组和模型组,分别给予相应药物进行干预。用药前、用药第7、14d,及停药第7d,取静脉血用实时荧光定量PCR法检测血清DHBV DNA含量。治
目的:针对不同哺乳类细胞建立相应的慢病毒体外感染体系以建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统。方法:⑴按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒(携带EGFP基因)包装(脂质体 介导的瞬时转染)、超速离心浓缩和保存等,随后用病毒上清或浓缩后的病毒感染293FT 细胞,24~48 h 后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功生产;⑵将携带EGFP基因的病毒上清或 浓缩后的病毒分别加
目的:基于慢病毒介导的转基因方法制备红色荧光蛋白(mRFP)转基因小鼠以建立基于该转基因方法制作转基因小鼠的技术平台。方法:将携带mRFP基因的慢病毒注射入ICR小鼠单细胞受精卵卵周隙以感染受精卵,胚胎移植进假孕母鼠以获得仔代小鼠,然后应用小动物活体成像仪、体视荧光显微镜和PCR等鉴定并获得mRFP 转基因鼠。结果:移植卵周隙注射有慢病毒的胚胎40枚给2 只假孕母鼠,共获得仔鼠6 只;利用体视荧光
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