种子细胞的培养、鉴定及诱导与支架材料的制备

来源 :第九届西部骨科论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huang_hh
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体外分离、培养、鉴定SD大鼠脂肪干细胞(ADSCs)、雪旺细胞(SCs),将脂肪干细胞诱导分化为雪旺样细胞(Schwann-like cells),制备SD大鼠去细胞神经支架,为下一步实验提供种子细胞及支架材料。研究表明,SD大鼠腹股沟脂肪垫分离的ADSCs在体外易于分离培养和传代扩增,特定条件下可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞,并表达间充质干细胞相关的表型,CD29,CD44,CD105表达率均在98%以上,说明所分离培养的细胞中ADSCs纯度高,细胞均一性好,可做为种子细胞的来源。ADSCs诱导三周后,荧光定量PCR显示S100β、GFAP基因表达上调倍数最高,说明转录水平最高;免疫组化结果显示细胞的S100β及GFAP阳性率也接近最高,且此时细胞活性较高,可用于修复SD大鼠坐骨神经缺损的下一步研究。单酶消化法复合植块法可以快速获得高纯度、高活性的SCs,并从基因及蛋白水平进行了鉴定,为神经功能的修复与重建提供了高质量的种子细胞,可做为下一步实验的阳性对照细胞。经化学试剂去细胞处理的神经支架细胞去除彻底,留下由细胞外基质构成的孔隙结构,为下一步实验提供了理想的去细胞神经支架。
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