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建立了动物源性食品中粘菌素残留的液相色谱-串联质谱-负模式检测方法.样品经甲醇-0.1%甲酸水提取,HLB柱净化、在负模式下采用多离子检测模式(MRM)进行定量分析.结果表明粘菌素在10-1000ng/mL浓度范围内呈现良好线性,R2为0.9987;方法定量下限为10 μg/kg,回收率在70.4%-103.4%之间.方法具有灵敏度高、重现性好等特点,能够满足物源性食品中粘菌素残留检测的相关法规要求.