【摘 要】
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楠木叶片中富含脂类、多酚和多糖类物质.比较了多种常规裂解试剂Tris-SDS、CTAB、异硫氰酸胍和多种Trizol试剂) 和改良方法对楠木叶片总RNA的提取效果.结果发现CTAB和多
【机 构】
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四川省林业科学研究院,四川成都,610081
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楠木叶片中富含脂类、多酚和多糖类物质.比较了多种常规裂解试剂Tris-SDS、CTAB、异硫氰酸胍和多种Trizol试剂) 和改良方法对楠木叶片总RNA的提取效果.结果发现CTAB和多种Trizol试剂 (Invitrogen,Cat no：15596-026；Ambion,Cat no：AM9738；H﹠Y Bio,Cat no：03730； Aidlab,Lot no：231527AX) 提取楠木总RNA的效果不理想.使用改良的Tris-SDS和异硫氰酸胍试剂裂解方法可以提取到满意的楠木叶片总RNA,总RNA产量可达40-65μg100mg 叶片)-1；A260nm/A280nm值为1.8-2.0,A260nm/A230nm值为1.9-2.1,说明糖类、蛋白质及其它污染低,总RNA质量较好.Tris-SDS和异硫氰酸胍试剂裂解方法提取到的总RNA,通过RT-PCR成功扩增出了楠木18SrRNA基因序长为113bp的特异条带.本实验确定了适用于楠木总RNA的提取方法,其具有经济、简便实用的特点.
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