PCV2 Cap蛋白的潜在肝素结合基序分析

来源 :第22届国际猪兽医协会大会(IPVS2012) | 被引量 : 0次 | 上传用户:pj00000pj
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  本文从PMWS患猪分离PCV2 48285株,采用定点突变技术对蛋白质进行序列分析,突变株和亲本株的感染性克隆转染到PK-15细胞中后,通过间接免荧光技术计算了PCV2阳性细胞数目,并在不同时间点收集了上清。通过病毒滴度测定和抗原捕获ELISA技术测定了感染性病毒颗粒数目及上清中的PCV2 Cap蛋白量。16株特异识别48285株的单克隆抗体被用于测试与突变体的反应性。结果:在转染后12小时即可检测到突变体病毒阳性细胞,并在36小时后迅速增加到最高值。转染后12-48小时,突变体病毒和亲本株之间复制能力差异并不显著。但在上清中的病毒数量,突变体病毒明显少于亲本病毒株(P<0.05)。通过抗原捕获ELISA可发现突变体病毒的OD450值明显低于亲本株(P<0.05)。从第二到第七代,突变体病毒滴度逐渐下降直到检测不到而亲本株病毒滴度则逐渐上升。突变体病毒与上述16株单抗均可发生反应。结论:97RIRKVKV 103是PCV2在PK 15细胞中的复制的关键基序。
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