化脓隐秘杆菌分离株编码大环内酯类ABC转运蛋白1509基因的分析

来源 :中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wutiepeng
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  [目的]本研究旨在分析外排蛋白介导的化脓隐秘杆菌对大环内酯类抗生素的耐药机制.[方法]根据化脓隐秘杆菌分离株BM-H06-3基因组测序结果中获得的大环内酯类ABC转运蛋白1509的核苷酸序列,设计特异性引物,运用PCR技术分别从对红霉素耐药水平不同的化脓隐秘杆菌分离株中扩增编码ABC转运蛋白1509的基因片段,与pEASY-T1克隆载体连接,转入到大肠杆菌感受态细胞Trans1-T1中,选取阳性克隆测序,并结合耐药表型进行分析;运用生物信息学方法对大环内酯类ABC转运蛋白1509进行分析.[结果]与HC-H03-3、BM07-1的ABC转运蛋白1509的基因序列相比,BM-H06-3的1509序列有21个碱基突变,分别引起4个和5个氨基酸发生改变.该ABC转运蛋白由240个氨基酸组成,理论等电点为6.60;具有ATP结合域,既有ATP酶活性,又可以结合核苷酸;同时拥有21个功能域.其二级结构是无规则卷曲、α-螺旋和伸展链为主的混合结构.[结论]化脓隐秘杆菌对红霉素的耐药可能与ABC转运蛋白相关,推测大环内酯类ABC转运蛋白1509可能通过ATP水解释放能量促进药物泵出细胞外.
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