【摘 要】
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采用组织块培养法启动二倍体、三倍体和四倍体泥鳅鳍组织细胞原代培养,并采用胰蛋白酶消化法传代,目前二倍体、三倍体和四倍体细胞已经分别传至59代、68代和68代.三种细
【机 构】
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大连海洋大学辽宁省海洋生物资源与生境修复重点实验室,辽宁大连116023
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采用组织块培养法启动二倍体、三倍体和四倍体泥鳅鳍组织细胞原代培养,并采用胰蛋白酶消化法传代,目前二倍体、三倍体和四倍体细胞已经分别传至59代、68代和68代.三种细胞均为成纤维细胞样细胞.原代培养和早期传代培养所用的培养基为DMEM/F12,添加20％的胎牛血清、10 μ g/mL人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、20 μ g/mLI型胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)以及10 μ g/mL硫酸软骨素.30代以后所用培养基为20％FBS-DMEM/F12.细胞培养在25℃、5％CO2培养箱中.在此条件下,二倍体、三倍体和四倍体的倍增时间分别为48.43h、36.01h和41.45h；二倍体、三倍体和四倍体的特征染色体数目分别为50、75和100条.不同倍性的泥鳅细胞系的建立丰富了鱼类细胞系的种类,为揭示多倍体鱼类生长、遗传等机制打下基础.
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