【摘 要】
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目的：探讨超声微泡造影剂在一定能量的超声波辐照下,介导DNA质粒转染视网膜母细胞瘤(RB)细胞的效率及可行性,为实现外源基因高效、定向的转移目的奠定基础。 方法：将培养的R
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院眼科 400010
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目的：探讨超声微泡造影剂在一定能量的超声波辐照下,介导DNA质粒转染视网膜母细胞瘤(RB)细胞的效率及可行性,为实现外源基因高效、定向的转移目的奠定基础。
方法：将培养的RB细胞分为六组,第1组仅以一定能量的超声波辐照,第2组仅加适当剂量的微泡造影剂,第3组仅加入质粒进行转染,第4组加入质粒与微泡进行转染,第5组加入质粒、微泡,并用一定能量的超声辐照,第6组予以脂质体转染。转染24~48h后,在荧光显微镜下观察EGFP表达情况,并用RT-PCR对EGFP mRNA进行半定量检测。同时对1、2组予以台盼蓝染色。
结果：超声微泡介导的DNA质粒对RB细胞的转染效率,与脂质体介导的质粒转染效率相似,明显高于其他实验组。一定能量和时间的超声波辐照,及适当浓度的微泡,对RB细胞的活性无明显抑制。
结论：利用低频率和一定能量的超声击碎携带EGFP质粒的超声微泡造影剂,能够有效地提高DNA质粒在RB细胞中的转染效率。
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