【摘 要】
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目的：比较不同的孵育时间及感染复数(MOI)下,牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis,P.g.)ATCC33277侵袭人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)的侵袭效能,并观察
【机 构】
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510515广州,南方医科大学南方医院·南方医科大学口腔医学院
【出 处】
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中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会第十次全国老年口腔医学学术年会
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目的：比较不同的孵育时间及感染复数(MOI)下,牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis,P.g.)ATCC33277侵袭人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)的侵袭效能,并观察P.g.入侵后在细胞内的分布情况,以及对细胞生物学效应的影响.方法：将P.g.ATCC33277以MOI为10：1、100：1分别感染HPDLCs 90min,8h,24h,48h后,联合使用300μg/mL庆大霉素和100μg/mL甲硝唑杀死胞外细菌,HPDLCs用蒸馏水裂解,将裂解液涂板,厌氧培养14天后观察羊血琼脂培养皿上细菌菌落数.P.g.ATCC33277以MOI为10：1感染HPDLCs 24h后,荧光共聚焦显微镜观察P.g.在细胞内的分布情况,扫描电镜观察细胞形态及黏附性能的变化,流式细胞术测定细胞增殖情况的变化.结果：联合使用300μg/mL庆大霉素和100μg/mL甲硝唑能够彻底杀灭胞外培养基中的细菌而对胞内细菌无影响；共同孵育90min后,活菌能够进入人牙周膜细胞；当MOI为10：1,共孵育时间为24h时,细菌侵袭细胞的侵袭效能达到最大值.荧光共聚焦显微镜显示牙龈卟啉单胞菌入侵细胞后,主要分布在细胞核周.扫描电镜结果显示：细菌入侵细胞后,细胞间连接断裂,细胞黏附性下降.流式细胞学结果表明P.g.感染HPDLCs 24h及48h后,能够促进细胞增殖.结论：本研究证明P.g.能够侵入HPDLCs并且引起细胞的结构破坏、黏附性能下降.P.g.可以通过损伤HPDLCs而加重局部的炎症反应,影响牙周组织的修复功能,这可能是牙周炎疾病的病理机制之一.
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