【摘 要】
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许多病毒感染可以激活宿主I型干扰素(IFN)信号通路,导致数以千计的干扰素刺激基因(ISG)转录,为机体提供抗病毒防御.猪瘟(CSF)是一种高度传染的病毒性疾病,其病原是猪瘟病毒(CSFV),严重危机世界各国的养猪业.目前,有关抗CSFVISGs的研究还很少.本研究主要利用20种慢病毒介导的过表达ISG细胞系筛选抗CSFV的ISG,我们筛选到鸟甘酸结合蛋白1(GBP1)是一个潜在的抗CSFV分子.
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许多病毒感染可以激活宿主I型干扰素(IFN)信号通路,导致数以千计的干扰素刺激基因(ISG)转录,为机体提供抗病毒防御.猪瘟(CSF)是一种高度传染的病毒性疾病,其病原是猪瘟病毒(CSFV),严重危机世界各国的养猪业.目前,有关抗CSFVISGs的研究还很少.本研究主要利用20种慢病毒介导的过表达ISG细胞系筛选抗CSFV的ISG,我们筛选到鸟甘酸结合蛋白1(GBP1)是一个潜在的抗CSFV分子.我们研究发现过表达GBP1显著抑制了CSFV的复制,然而利用针对GBP1的小干扰RNA沉默内源性的GBP1可以促进CSFV复制.此外,我们证实GBP1发挥抗CSFV主要发生在病毒复制早期和抑制CSFV IRES翻译效应.我们也发现CSFV感染猪或PK-15细胞后,可以引起GBP1在转低水平上调表达.免疫沉淀实验和GST pulldown实验结果表明,GBP1与CSFV NS5A蛋白存在相互作用,其相互作用功能区位于GTPase活性区,即GBP1 N端的1-308 aa.有趣的是,我们的研究还发现,GBP1 (K51A)突变体丧失了GTPase活性,且不能抑制CSFV复制.我们进一步研究表明,NS5A与GBP1相互作用抑制了GBP1的GTPase活性,进而拮抗了GBP1的抗病毒功能.总之,GBP1是一个抗CSFV的ISG,其发挥抗病毒作用依赖于其GTPase活性.
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