基因芯片检测奶牛乳房炎主要致病菌的方法研究

来源 :第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunx
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为提高奶牛乳房炎主要致病菌的检测速度和准确性,建立一次实验就能检测奶牛乳房炎主要致病菌的方法,从而为临床治疗提供依据,我们建立了用基因芯片检测奶牛乳房炎主要致病菌的方法.利用生物信息学手段和查阅文献资料设计了金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌、绿脓杆菌、停乳链球菌、乳房链球菌6种奶牛乳房炎主要致病菌的通用引物和金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的寡核苷酸探针及无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌的特异引物,并用这三种特异引物扩增的片段的纯化产物作为这三种链球菌的检测探针.在引物对样品中的细菌相应的基因片段扩增的同时进行靶基因的生物素标记,扩增的产物与硝酸纤维素膜上的探针进行杂交,酶联、显色后根据芯片扫描仪的判读结果来确定奶牛乳房炎致病菌感染的种类.结果表明:我们建立的以16SrDNA为对象的基因芯片检测方法,可以快速的检测出以上6种细菌,整个检测过程需要6-7小时,灵敏度大大提高,特异性较好,能快速的对奶牛乳房炎的主要致病菌作出诊断.基因芯片用于奶牛乳房炎主要致病菌的检测是一种探索,具有实践意义。
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