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采用优化的病毒蚀斑分析法(PFU)和组织细胞培养半数感染剂量(TCID50)法,在三种细胞系MA-104、Caco-2和Vero中,对猴轮状病毒标准株SA-11进行滴度测定.
结果表明,胰蛋白酶处理过的SA-11在MA-104和Caco-2细胞中形成较好的病毒空斑,两种细胞形成的空斑数较一致;而SA-11在Vero细胞中很难观察到病毒空斑和细胞病变.确定可利用这两株细胞进行蚀斑分析和病毒的分离鉴定,Vero细胞不适合作为蚀斑分析的细胞。TCID50实验结果表明,蚀斑分析法与 TCID50法的敏感性相同,按照波松分布规律,即1个PFU=1.44个TCID50.同时,利用PCR技术对产生了蚀斑的细胞进行cDNA的扩增。结果表明,所扩增的片段是猴轮状病毒标准株SA-11的VP7基因序列,直接证明蚀斑分析法和TCID50法的特异性。