【摘 要】
:
本文将汉滩病毒76-118株囊膜糖蛋白G1基因与Ras基因连接,构建嵌合基因Ras-G1及Ras-G1(G1无前导肽序列);将两个嵌合基因克隆入酵母表达载体pMet25,并染至酵母温度敏感株cdc25-2,并检测其对RRS系统的激活作用。研究结论:Met-G1和Met-G1载体可用于从cDNA文库中筛选汉滩病毒受体。
【机 构】
:
第四军医大学基础部微生物学教研室,710032
【出 处】
:
第五次全国医学分子微生物学学术研讨会
论文部分内容阅读
本文将汉滩病毒76-118株囊膜糖蛋白G1基因与Ras基因连接,构建嵌合基因Ras-G1及Ras-G1(G1无前导肽序列);将两个嵌合基因克隆入酵母表达载体pMet25,并染至酵母温度敏感株cdc25-2,并检测其对RRS系统的激活作用。研究结论:Met-G1和Met-G1载体可用于从cDNA文库中筛选汉滩病毒受体。
其他文献
本文采用抗丙型肝炎病毒(HCV)第一高变区(HVR1)抗体,建立病毒捕获实验。重组表达HVR1嵌合抗原,免疫家兔,制备抗HVR1抗体,与20例病人阳性血清反应,通过HCVRT-PCR检测捕获结果。研究结果:在20例样品中有4例完全捕获,15例部分捕获,仅1例未捕获。研究结论:抗HVR1多抗可高交叉捕获HCV病毒。
本文将p65BD完整阅读框架部分亚克隆至pGBKT7DNA-BD载体,然后以GAL4DNA-BD/p65BD为靶蛋白,筛选16肽随机肽库,在1.28×107个转化子中筛选到5个阳性克隆,进行EMSA实验,结果表明其中一条多肽能够竞争抑制制NF-κB与其DNA探针的结合,提示此多肽可能具有竞争抑制NF-κB转录调节活性的功能。
本文探讨XL1-Blue菌株电转化的最优条件.通过改变电压、质粒DNA浓度、细菌生长周期等影响电转化的重要条件,做出转化率的变化曲线,从中探索电转化的最优条件。实验结果得出在电容25μF,电阻200Ω,电压2.5KV,OD600=0.3~0.4,0.2cm电转化杯,DNA终浓度0.1μg/ml,感受态细胞终浓度2.5×1012,氨苄青霉素浓度50μg/ml的条件下,电转化效率最高。
本文为验证所构建的重组载体能够在酵母哺乳动物细胞中穿梭表达,从而研究酵母作为载体在口服基因治疗及免疫中的作用,以脂质体介导将该质粒分别向人血管内皮细胞HUEVC、绿猴肾细胞COS-7、宫颈癌细胞Hela、胶质瘤细胞9L、乳腺癌细胞进行了转染,有报告基因GFP表达后发出的绿色荧光,证明其能够在哺乳动物细胞中表达。所获得的新型的穿梭载体为口服酵母在基因治疗中的应用提供了物质准备。
本研究利用树突状细胞作为抗原提呈细胞,用带有LMP2A基因的重组腺病毒转染DC,诱导出针对LMP2A特异性CTL。研究成果:利用腺病毒高效转移外源DNA具有安全性好、转染后对DC表型和多种功能没有任何影响等特点,转基因的方法可以让LMP2A抗原多种表位在DC中都能表达,且相同HLA等位基因可提呈多个抗原肽,让DC选择合适的靶肽,同时通过MHCⅠ及MHCⅡ类分子限制性抗原提呈途径诱导CTL。
本文利用流式细胞仪技术分析病毒作用三种人胰岛β细胞CM、HP62、TRM6以及正常人胰岛β细胞(NormalBetaCell,NBC)前后细胞表面表达CD56的变化。研究结论:随着病毒作用人胰岛β细胞时间的延长,细胞表面CD56表达量下降,CD56是否在IDDM致病中起作用有待进一步研究。
本文对40株经荧光定量PCR方法检测HCMV-DNA为阳性的临床低传代分离株进行HCMV-UL140全序列PCR扩增,将扩增阳性的PCR产物中具有代表性的11株进行UL140基因全序列测定及结果分析。研究结论:临床低传代分离株HCMV-UL140基因DNA及其编码产物的氨基酸序列与Toledo株比较存在一定多态性;未发现HCMVUL140基因多态性与HCMV感染不同致病性有关。
本文为了对肝豆状核变性基因第8外显子突变热点区进行快速筛查和便于临床基因诊断的需要,利用DHPLC技术对Wilsons病基因第8外显子突变热点区进行了突变检测,通过测序证实,DHPLC技术的阳性检出率为100﹪,此技术具有快速、敏感、准确且经济的特点,可用于临床肝豆状核变性的基因诊断。
本文为建立金属β内酰胺酶基因(blaIMP)简并引物聚合酶链反应方法,从美国国立生物信息中心(NCBI)[www.ncbi.nlm.nih.gov]检索已登录的blaIMP基因,自行设计简并引物和PCR反应体系。研究结论:简并引物PCR法检测blaIMP基因的建立将有利于产金属β内酰胺酶菌筛查和监测。
本文用大肠杆菌表达系统分别表达了SARS-CoV的结构蛋白S、N、M、E和非结构蛋白3CL,并用SARS恢复期患者血清对重组病毒蛋白的抗原性的进行了Western-blot分析;再根据表达载体的多克隆位点和阅读框架的要求,分别合成各抗原基因引物,以合成的基因为模板,扩增相应的抗原基因。研究结果表明,N抗原和S抗原可作为SARSCoV感染的重要检测抗原.