层析过程中蛋白柔性介导的微观保留机理研究

来源 :2015中国化工学会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zuguangle
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蛋白结构稳定性是决定蛋白质在层析过程中蛋白的吸附取向、构象变化以及最终层析保留行为的关键因素.本研究突破以往蛋白液固界面蛋白结构表征的瓶颈,以蛋白质分子表面和内部的氨基酸质子与氘交换速率差异机制为基础,利用核磁共振技术(NMR)以及石英晶体微天平(QCM),根据核磁共振TOCSY谱图氢信号损失程度以及蛋白吸附层的刚性变化,评价了离子交换过程中蛋白质柔性介导的层析保留行为.结果显示,蛋白柔性增强将导致蛋白去折叠程度增强、保留时间延长.本研究证实核磁共振结合氢氘交换技术是一种通用性较好的蛋白残基尺度微界面分析方法,不仅可应用于层析领域中多孔微球材料与蛋白的微界面行为研究,也可用于酶固定化载体、免疫分析微球、生物传感材料等多种新型生物材料的微观作用研究.
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