论文部分内容阅读
引言牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrh ea virus,BVDV)属于黄病毒科瘟病毒属,可造成持续性感染和免疫抑制。目前报道的BVDV共有三种,BVDV1、BVDV 2和BVDV 3,BVDV 3又被称为HoBi样瘟病毒(HoBi like pestivirus)或Atypical pestivirus。目前,国内针对山羊源BVDV的研究报道很少,本研究主要对江苏省山羊养殖场内BVDV的流行分布情况进行调查。材料与方法样品:2011年至2013年从江苏省6个地区共采集样品238份,其中73份样品来自腹泻或流产山羊,其余165份来自健康山羊。样品检测及数据分析:提取样品RNA,用瘟病毒5’-UTR区域通用引物进行(Panpesti generic primers)RT-PCR检测,扩增其5’-UTR基因,连接至pMD-18-T载体并测序。用DNAstar、MEGA5.1等生物学软件分析测序结果,并与标准毒株以及国内外分离毒株的5’-LTR进行进化分析。结果与讨论根据RT-PCR检测及测序,在采集样品的6个地区中,共有5个地区检测到BVDV。在238份样品中,共31份样品为BVDV阳性,阳性率为13.0%(31/238)。31份阳性样品中,有17份样品来自表现临床症状的动物,其中6份来自流产山羊,9份来自腹泻山羊,2份来自弱羔。结果表明,无论山羊是否具有临床症状,都存在BVDV感染。BVDV感染可能导致流产与腹泻,但是需要进一步验证。通过DNAstar进行比对,31份BVDV阳性样品中共存在9个代表毒株。用MEGA5.1进一步进化分析,其中8株为BVDV 1,1株为BVDV3。8株BVDV 1可以分为4个亚型:BVDV 1b(n=3),BVDV 1p(n=1),BVDV 1m(n=2)和BVDV 1o(n=2)。目前,在国内动物中流行的BVDV共有10个亚型,BVDV-1a,BVDV-1b,BVDV-1c,BVDV-1d,BVDV-1 m,BVDV-1o,BVDV-1p,BVDV-1q,BVDV-lu和BVDV-2a。本次山羊BVDV流行病学调查中所发现的四个BVDV 1亚型均在已经报道的亚型之中,并与现有报道中牛的BVDV的四个亚型的同源性较高,山羊与牛感染BVDV可能存在跨种感染。BVDV 3自然感染牛可以导致发病,出现呼吸道症状及流产,但是目前报道的自然感染宿主仅限于牛,未见其它动物感染BVDV 3。本研究首次发现山羊可自然感染BVDV 3,扩大了BVDV 3的宿主范围。经序列分析,该BVDV3毒株与之前在国内发现的HoBi样瘟病毒JS12/01的同源性高达98%。该BVDV3感染是否属于个例,及BVDV3何时及通过何种途径感染山羊都有待继续研究。