【摘 要】
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<正>目的:快速构建哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法:分离外周血淋巴细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,采用Dgen生物技术公司抗体基因库构建试剂盒,用RT-PCR的方法扩
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<正>目的:快速构建哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法:分离外周血淋巴细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,采用Dgen生物技术公司抗体基因库构建试剂盒,用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区(VH)和全长Kappa型轻链(LCκ)基因库,分别插入载体pDGB-HC-TM,化学转化感受态大肠杆菌DH5a,构建抗体轻、重链基因库,然后将轻、重链基因库联合转染CHO细胞,流式细胞仪分析全长人源抗体在CHO细胞表面的表达。
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