牛传染性鼻气管炎病毒RPA-LFD快速检测方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:acup
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本研究基于IBRV基因保守序列,设计并合成引物和探针组合,目的片段大小为247种,优化反应条件和反应体系,建立了一种IBRV RPA等温侧流层析(LFD)检测方法。结果表明,所建立的RPA方法在38℃水裕锅中恒温反应25min,结果即可在侧流层析试纸条上清晰显示:以已知病毒滴度的IBRV提取DNA后进行同步检测,结果显示可以检测到0.8TCID50的靶标分子,具有较高的灵敏度。与其它病毒(BVDV BPIV-3BEV BcoV BRV BEFV)cDNA均无交叉反应,具有较好的特异性。用所建立的方法检测鼻拭子共计20份,结果与实时荧光定量方法检测的符合率为100%。牛传染性鼻气管炎病毒RPA-LFD检测方法的建立,为临床现场检测及疫情监测等提供新一代的检测技术与手段。
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