绿茶隶属于茶树科,主要分布于东亚,印度以及东南亚。绿茶作为仅次于水的世界第二大饮品,由于它对人体的多种有益功效而受到全世界人民的青睐。然而,目前对于绿茶提取物对绝经后骨质疏松症的功效还是未知的。本篇文章探究了在体内绿茶提取物对于雌激素缺乏导致的骨质疏松症的作用,同时还在体内探究了其可能存在的作用机制。本文采用切除卵巢的雌性大鼠作为绝经后骨质疏松的动物模型,使用剂量分别为60 mg/kg, 120 mg/kg, 370 mg/kg的绿茶提取物对大鼠进行为期13周的连续灌胃给药,给药结束后处死,对血清的生化参数,如:骨钙素(BGP)、碱性磷酸盐(ALP)、磷酸酶(ACP)、雌激素(E2)、白介素-1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)等进行检测。采用苏木精-伊红(H&E)法对骨组织及其他组织进行染色切片观察。同时,本课题还初步探究了绿茶提取物在体外对核因子kappaB配体(RANKL)诱导的破骨细胞分化的抑制作用及机制。雌性大鼠的卵巢被切除以后,骨代谢平衡被打破,骨吸收大于骨形成,骨微结构被破坏,骨转换增强,这种特性较好地模仿了人正常绝经时高转换型骨质疏松发生时的骨丢失状态。同时,手术后雌性大鼠在骨质疏松性骨折和骨量减少部位上,也表现出与人类疾病很大的相似性。雌激素是生殖功能最基础的调节因子,但是现在有越来越多的研究表明,这些调节因子还对许多非生殖过程起着重要的作用。在绝经后,卵巢停止分泌雌激素,这种雌激素分泌的大幅降低除了导致骨质疏松症之外,还可能导致心血管疾病以及血管舒缩的不稳定。绝经后的妇女经常会出现体重增加的症状,前人的研究指出,人体的体脂含量常与骨量呈现负相关,所以采取膳食干预或是减少脂肪的摄入和堆积有助于增加骨量,从而预防骨质疏松。在本研究的动物实验部分,模型组大鼠在摘除卵巢后,其体重,血清学指标,脏器系数,骨生物力学参数及骨微结构与假手术组相比都有显著改变,表明切除卵巢致大鼠骨质疏松模型成功。在本文中观察到高剂量的绿茶提取物能显著降低切除卵巢后造成的大鼠体重增加,而其他剂量对于大鼠体重的影响虽然没有统计学差异,但也存在减轻趋势。而在脏器系数方面,绿茶提取物能一定程度上提高去卵巢大鼠的股骨和子宫脏器系数,这种提高虽然也只是一种趋势,但是在某种程度上表明绿茶提取物对雌激素缺乏引起的骨质疏松有着改善作用。骨作为人体一种复杂的组织,它的主要功能是抵抗机械损伤,吸收外界压力。骨骼的强度取决于骨骼组织的数量和质量,它是由骨骼的几何形状小梁骨形态的微观结构、皮质厚度和孔隙度决定的。骨强度同时也与骨转换,骨矿物组成及骨胶原息息相关。我们的研究表明,绿茶提取物能改善去卵巢大鼠的骨密度,骨生物力学性能及骨微结构,提示绿茶提取物对于绝经后骨质疏松有显著改善。众所周知,破骨细胞的分化是由一系列标记基因指导的,例如NFATc1, TRAP,c-Fos, c-Src, cathepsin K和MMP-9。我们的实验数据表明,在RAW267.7细胞中,NFATc1能被RANKL诱导而出现显著的表达上调,绿茶提取物能显著降低这种由RANKL诱导的高表达。NFATc1表达量的下调意味着绿茶提取物能抑制RAW264.7细胞分化成破骨细胞的能力。Cathepsin K是一种最主要由破骨细胞表达的半胱氨酸蛋白酶。这种酶会裂解关键的骨基质蛋白,在骨吸收过程中起着重要作用。研究表明,CathepsinK的过表达会扰乱骨代谢,从而导致骨流失。绿茶提取物能显著降低由RANKL诱导的CathepsinK过表达,这说明绿茶提取物通过抑制Cathepsin K表达来减少骨流失。而c-Fos和MMP-9则是RANKL诱导破骨细胞分化过程中的两个重要的转录因子,从我们的实验数据看,绿茶提取物也能显著抑制这两个基因的表达。综上所述,我们的实验表明,绿茶提取物能抑制破骨细胞分化相关基因的转录和蛋白的表达。总的来说,本文研究证明了绿茶提取物能改善更年期绝经后所带来的许多健康问题,比如体重增加和器官病变等。在血清学检测中,也发现绿茶提取物能减轻绝经后带来的骨流失问题。我们还阐明了绿茶提取物能通过抑制破骨细胞分化相关基因和蛋白的表达来改善绝经后骨质疏松。