【摘 要】
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<正>体积排阻色谱主要是根据蛋白质分子量的大小及分子形状进行分离的,但是对于分析柱而言,填料大多数采用的是球形硅质填料,由于这些填料的性质,在一定程度上会表现出疏水作
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<正>体积排阻色谱主要是根据蛋白质分子量的大小及分子形状进行分离的,但是对于分析柱而言,填料大多数采用的是球形硅质填料,由于这些填料的性质,在一定程度上会表现出疏水作用及离子作用。因此,合适的流动相能提高柱效、促进蛋白质的分离。体积排阻色谱能够有效地除去变性剂,例如,盐酸胍、脲等,因此,体积排阻色谱法能够成为蛋白质复性的一种手段。但对于SDS而言,由于SDS能够与蛋白质紧密地结合,且不易除去, 另外,SDS有较低的临界胶束浓度,在有效变性的浓度范围内,通常以微球形式与蛋白质结合;如果将蛋白质与SDS分离开来,蛋白质的分子量至少大于20KD,这可能就是包涵体复性时一般不选择SDS的原因。本文通过改变盐离子梯度及有机溶剂的浓度,来探讨流动相对不同形态下的蛋白质在体积排阻色谱柱上的保留行为的影响。
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