论文部分内容阅读
目的:初步分析、探讨不同浓度的重组人血管内皮抑素(恩度)对人多发性骨髓瘤细胞U266增殖的抑制作用及作用机制,而为重组人血管内皮抑素用于多发性骨髓瘤的治疗提供理论依据.
方法:采用不同浓度的重组人血管内皮抑素作用于体外培养人人多发性骨髓瘤细胞U266,通过台盼蓝据染法、MMT法、流式、TUNEL法及透射电镜等方法,从形态学以及增殖等方面,分析不同浓度的重组人血管内皮抑素对人多发性骨髓瘤细胞U266生长的作用特点.
结果:1)细胞形态学改变:与对照组细胞相比,U266细胞经重组人血管内皮抑素(药物浓度为100μg/ml)作用24h后,细胞就出现胞膜皱缩现象,同时细胞的折光性也明显降低,胞浆内颗粒明显增多;随时问推移,上述现象有加重趋势;2)台盼兰活细胞计数测定细胞存活情况:与对照组细胞相比,经重组人血管内皮抑素作用24h后,U266活细胞计数明显偏低(P<O.05),随时间推移,两组间活细胞计数差值呈增加趋势;3) MTT比色法测定细胞增殖情况:用药72小时后,重组人血管内皮抑素组的细胞增殖受抑程度强,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05); 4)细胞凋亡检测:Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测发现,U266细胞经重组人血管内皮抑素(药物浓度为100μg/ml)作用72h后,细胞凋亡率为38.6%,明显高于对照组细胞的自然凋亡率(2.9%),差异具有统计学意义(P<0.05); U266细胞经重组人血管内皮抑素(药物浓度为100μg/ml)作用72h后,琼脂糖凝胶电泳中可以看到有DNA“梯”状条纹的出现,而对照组不明显;5) TUNEL法检测凋亡细胞数的结果:U266细胞经重组人血管内皮抑素(药物浓度为100μg/ml)作用72h后,细胞凋亡率为40.6%,明显高于对照组细胞的自然凋亡率(3.2%),差异具有统计学意义(P<O.05)。
结论:重组人血管内皮抑素(恩度)在体外具有抑制多发性骨髓瘤细胞增殖的特性,其作用机制是诱导细胞凋亡。