新生大鼠海马细胞原代培养及缺氧缺血模型的建立

来源 :第六届苏皖新生儿学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:whwoicq123
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  目的:新生儿缺氧缺血性脑损伤(HIBD)病理复杂,海马在缺血早期即可受到影响.本文探讨海马细胞缺氧缺血模型的建立方法.方法:技术手术剥离、收集24小时新生大鼠海马,加入胰酶37℃消化10分钟,胰酶消化,97%Neurobasal-A+2%B27+1%谷氨酰胺的无血清培养液,每隔3d进行半量换液,每天用相差显微镜观察细胞形态,并加入CCK-8后培养2小时,利用酶标仪(波长450nm)测定细胞增殖活性,并绘制生长曲线;培养至第十天后NSE、MAP-2免疫荧光染色鉴定海马神经元细胞;并将培养基更换为不含葡萄糖的EBSS,将培养板移入到潮湿密闭容器内,37℃恒温箱内,充以50ml/LCO2+950ml/LN2(体积比)混合气体.分别缺氧0.5h,1h,2h后取出细胞,恢复正常条件后继续培养24小时,相差显微镜拍照后加CCK-8,酶标仪测存活度.
其他文献
目的:分析探讨蓝光照射对新生儿黄疸治疗的影响。方法:随机选取2012年1月-2015年1月间,我院接诊并行蓝光照射治疗的新生儿黄疸患儿36例。依据患儿病情及其监护人意愿的情况下,将患儿分为间歇组和持续组。间歇组患儿采用短时多次蓝光照射方式进行治疗,持续组患儿采用长时间蓝光照射方式进行治疗。通过临床和随访资料,对患儿治疗前后的血清胆红素浓度、不良反应发生情况及总体治疗效果进行回顾性分析总结。
目的:选择安全、有效的早产儿PICC操作中疼痛干预措施。方法:随机选择于2011年1月至2013年12月、出生24小时内入住我院新生儿科、进行PICC操作的早产极低出生体质量儿120例,剔除因病理原因禁食或使用镇静剂的病例。所有病例按照随机对照原则分为干预组(非营养性吸吮组30例、局部皮肤涂抹复方利多卡因乳膏组、非营养性吸吮+局部皮肤涂抹复方利多卡因乳膏组30例)和对照组(30例)。
目的:评价早期输注不同剂量氨基酸对早产儿氮平衡的影响.方法:选取2010年4月~2011年3月在我院分娩且出生后24 h内入住新生儿科、胎龄≤32周、出生体重≤2000g的早产适于胎龄儿90例,排除先天性消化道畸形、严重肝肾功能不全及严重肺部疾病和遗传代谢性疾病.随机分成三组,每组各30例,大剂量组于生后24h内给予2.0g.kg-1.d-1的氨基酸,每日递增1.0g·kg-1.d-1,最大剂量为
目的:探讨提高超低出生体重儿(ELBWI)存活率及减少后遗症的方法.方法:对2004年-2012年我院收治的37例ELBWI的资料进行回顾性分析.结果:1.37例ELBWI治愈15例,好转7例,死亡3例,放弃12例.2.ELBWI的常见并发症为新生儿窒息、喂养不耐受、新生儿呼吸窘迫综合怔(NRDS)等,其中死亡病例中发生NRDS、呼吸暂停、新生儿窒息、喂养不耐受、脑室周围脑室内出血(PIVH)均较
目的:对惊厥新生儿临床特点和视频脑电图进行分析,为临床工作中新生儿惊厥的诊断及分析提供参考.方法:总结60例住院新生儿惊厥病例,分析其—般情况、临床表现、常见病因、发作形式及脑电图结果.结果:60例惊厥新生儿中常见病因分别为缺氧缺血性脑病(33.3%)、感染(13.3%)、低血糖(10.0%)、颅内出血(8.3%)及电解质紊乱(8.3%).发作形式最常见的是微小发作(41.7%),其次是阵挛发作(
目的:探讨NICU无陪病房内,桡动脉采血后有效止血按压方法。方法:将216例住院新生儿根据入院时间随机分为3组,对照组拔针后直接用普通医用胶布固定棉球压迫止血,观察组在此基础上加用弹力绷带固定,并分别于按压后3-5min和5-10min取下弹力绷带。观察3种按压方法患儿手部皮肤温度、颜色以及按压结束后穿刺点出血量。
目的:探讨低聚半乳糖(GOS)对早产大鼠肠道菌群的调节作用.方法:早产新生大鼠随机分为GOS组和对照组,GOS组每天滴管喂养低聚半乳糖4g/kg,共14d.于喂养GOS后7d和14d,观察大鼠一般情况并称重,同时取大鼠直肠末端粪便,行双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌及肠球菌培养并行菌落计数.
目的:通过静息和任务状态脑电功率的比较研究,探讨新生儿脑功能的发展特征.方法:足月新生儿53名,按日龄分三组(第一组1-10天,第二组11-20天,第三组21-28天).oddball范式听觉刺激下记录任务脑电,进行静息(常规)与任务δ频段脑电功率的比较分析.
目的:在临床儿科中,新生儿黄疸是常见的多发疾病,主要原因是由于新生儿体内的胆红素代谢出现异常或代谢不够成熟所致,患儿发病时胆红素含量会持续上升,导致皮肤表面黄疸、巩膜或者黏膜黄疸。病情严重者可导致胆红素脑病,危及患儿生命。根据临床资料显示,新生儿黄疸在早产儿中的发生几率为80%左右,在足月儿中的发生几率为50%,因此,早发现、早治疗是治疗该病的关键。
目的:探讨3M液体敷料对预防早产儿敷贴性皮肤损伤的应用效果。方法:选择使用3M透明敷贴固定静脉导管的早产儿100例,按入院时间顺序随机分为观察组(n=50)和对照组(n=50),两组各有外周静脉留置针35例,经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)15例。静脉穿刺成功后,观察组先用3M液体敷料涂抹皮肤,干燥后再贴3M透明敷贴固定静脉导管;对照组常规用3M透明敷贴固定静脉导管。比较两组早产儿移除透明敷