【摘 要】
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重建人体组织是皮肤和眼刺激性/腐蚀性替代试验中常用模型之一，唆哇蓝(MTT)比色法是这些试验中常用的检测组织活力方法。MTT比色法的原理为活细胞线粒体中的玻拍酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲履(Formazan)并沉积在细胞中，死细胞则无此功能。使用溶剂溶解Formazan，用比色法在540或720nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。此方法运用在重建人体模型时，某些
【机 构】
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欧莱雅亚太地区安全评估部,上海市浦东新区金豫路550号 201206
【出 处】
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2016(第二届)毒性测试替代方法与转化毒理学(国际)学术研讨会暨有害结局路径(AOP)与风险评估培训会议
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重建人体组织是皮肤和眼刺激性/腐蚀性替代试验中常用模型之一，唆哇蓝(MTT)比色法是这些试验中常用的检测组织活力方法。MTT比色法的原理为活细胞线粒体中的玻拍酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲履(Formazan)并沉积在细胞中，死细胞则无此功能。使用溶剂溶解Formazan，用比色法在540或720nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。此方法运用在重建人体模型时，某些易在组织表面着色的物质会和Formazan-同溶解在溶剂中，干扰吸光值。通过实验分析，实验结果肯定了HPLC/UPLC-分光光度法的有效性，且可以避免着色物质的干扰，扩展了Episkin皮肤模型对化妆品原料测试的能力。HPLC/UPLC-分光光度法作为MTT比色法有效的补充已经在多个实验中得到验证，并且获得了DECD的认可，有条件的国内实验室可逐步开展验证工作，扩展运用重建人体组织模型检测刺激性和腐蚀性的试验的检测能力，促进体外替代试验的发展。
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