【摘 要】
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目的：探讨儿童SLE血清中BAFF和APRIL表达水平及与疾病的相关性。方法：以2005年11月至2007年8月在儿童风湿免疫科确诊患儿为研究对象。运用单抗制备及鉴定，从外周血单个核细胞中提取总RNA, RT-PCR扩增出人BAFF, APRIL基因，将该基因插入原核表达载体中表达，纯化后免疫小鼠，制备单克隆抗体。另将BAFF, APRIL基因利用慢病毒表达载体转染入CHO细胞，制备稳定表达BAF
【机 构】
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首都儿科研究所附属儿童医院儿童风湿免疫科 100020 北京协和医学院基础医学研究所免疫室 100
【出 处】
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2011年全国儿科风湿性疾病诊治专题研讨会
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目的：探讨儿童SLE血清中BAFF和APRIL表达水平及与疾病的相关性。方法：以2005年11月至2007年8月在儿童风湿免疫科确诊患儿为研究对象。运用单抗制备及鉴定，从外周血单个核细胞中提取总RNA, RT-PCR扩增出人BAFF, APRIL基因，将该基因插入原核表达载体中表达，纯化后免疫小鼠，制备单克隆抗体。另将BAFF, APRIL基因利用慢病毒表达载体转染入CHO细胞，制备稳定表达BAFF, APRIL的细胞株，用FACS和ELISA方法筛选识别天然形式的单克隆抗体，并用western blot方法验证了该抗体识别的特异性。结果：单克隆抗体鉴定中本实验制备的BAFF, APRIL单抗，敏感性好，特异性高，能够达到血清中BAFF, APRIL水平的检测极限。BAFF在血清中表达水平：活动期儿童SLE为15.5±12.67 Au/ml，非活动期儿童SLE为11.62±10.55 Au/ml，较幼年慢性关节炎组、非风湿疾病组和正常对照组均升高。结论：BAFF和APRIL在儿童SLE患者血清中表达水平均升高，且与疾病活动性相关。
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