【摘 要】
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目的 建立一种快速、简单的检测粪便幽门螺杆菌的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification, LAMP).方法 针对幽门螺杆菌的16S rRNA基因设计4条特异性
【机 构】
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南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心,广州 510515
【出 处】
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中国工程科技论坛第115场——临床分子诊断暨第二届中国分子诊断技术大会
论文部分内容阅读
目的 建立一种快速、简单的检测粪便幽门螺杆菌的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification, LAMP).方法 针对幽门螺杆菌的16S rRNA基因设计4条特异性引物(两条内引物和两条外引物),优化反应条件后,对方法的敏感性、特异性进行评估,并检测粪便模拟标本的敏感性,通过加入核酸染料和琼脂糖凝胶电泳观察结果.结果 使用LAMP方法可以在2h内得到检测结果,加入染料后阳性结果为绿色,电泳后有明显的阶梯状条带.幽门螺杆菌的基因组DNA检测敏感性为12pg,是普通PCR的10倍,对模拟粪便标本进行检测,检测限为102CFU/ml.金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌的检测结果均为阴性.结论 本研究建立的检测幽门螺杆菌的LAMP方法敏感性高、特异性强,操作简单,不需要特殊设备,是有前途的检测方法.
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