【摘 要】
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研究目的：本文通过研究仿刺参Apostichopus japonicus漆酶型酚氧化酶(PO)的分子生物学特性,为漆酶型PO在棘皮动物中的免疫和生理功能研究积累数据.研究方法：通过RACE技术克隆扩增仿刺参体腔细胞中漆酶型PO的cDNA全长；通过SMART、ClustalW2分析比较仿刺参与其他海洋无脊椎动物间漆酶型PO的结构差异；通过MEGA5.1用邻接法构建系统发生树,分析仿刺参漆酶型PO与其
【机 构】
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辽宁省海洋水产科学研究院,辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室,大连 116023
【出 处】
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“全球变化下的海洋与湖沼生态安全”学术交流会
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研究目的：本文通过研究仿刺参Apostichopus japonicus漆酶型酚氧化酶(PO)的分子生物学特性,为漆酶型PO在棘皮动物中的免疫和生理功能研究积累数据.研究方法：通过RACE技术克隆扩增仿刺参体腔细胞中漆酶型PO的cDNA全长；通过SMART、ClustalW2分析比较仿刺参与其他海洋无脊椎动物间漆酶型PO的结构差异；通过MEGA5.1用邻接法构建系统发生树,分析仿刺参漆酶型PO与其他动物PO间的进化关系；通过real-time PCR分析漆酶型PO在仿刺参中的组织分布和免疫刺激后的表达变化.研究结果：仿刺参漆酶型PO cDNA全长2508bp,含1个N端跨膜结构域和3个铜氧化酶结构域,显著不同于其他海洋无脊椎动物漆酶型PO,且海洋无脊椎动物各物种间甚至同一物种中不同漆酶型PO间序列保守性低.动物PO聚类为漆酶型PO和非漆酶型PO两大类,其中无脊椎动物漆酶型PO可粗略分为软体动物和非软体动物漆酶型PO两大类.在所有动物PO中,仿刺参漆酶型PO与昆虫漆酶型PO进化关系较近.漆酶型PO在仿刺参各组织中均有分布,但在体腔细胞中表达水平最高.脂多糖、肽聚糖、酵母多糖A和聚肌胞苷酸刺激仿刺参后,漆酶型PO应答变化快速且显著.针对不同免疫刺激,仿刺参漆酶型PO分别呈现不同规律的应答.结论：仿刺参漆酶型PO是一种膜蛋白,在结构上与其他海洋无脊椎动物漆酶型PO差异显著,在系统发生上与昆虫漆酶型PO进化地位接近,且不同海洋无脊椎动物漆酶型PO间序列保守性低；仿刺参漆酶型PO对病原刺激敏感,且对不同病原刺激有特异性的应答变化规律,显示出漆酶型PO具有潜在的病害预警功能；除免疫功能外,漆酶型PO还可能参与体色形成、污染物去毒等生理过程,其在棘皮动物中的功能和调控机制值得深入研究和探讨.
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