【摘 要】
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甾醇激素是由胆固醇、性腺及胎盘产生并在哺乳动物体内发挥重要作用的一类激素[1]。它们与很多内分泌和肿瘤疾病有关,因此对这些甾醇激素定量分析可以更好的探究与甾醇激素相
【机 构】
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生物医学分析化学教育部重点实验室武汉大学化学与分子科学学院;
【基金项目】
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科技部973计划课题(2012CB720601,2013CB910702);国家自然科学基金资助项目(21475098,91217309)
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甾醇激素是由胆固醇、性腺及胎盘产生并在哺乳动物体内发挥重要作用的一类激素[1]。它们与很多内分泌和肿瘤疾病有关,因此对这些甾醇激素定量分析可以更好的探究与甾醇激素相关疾病的机理。但是由于这些激素在体内的浓度较低,结构较相似,同时精确的定量这些激素一直是一个挑战。本文利用稳定同位素标记-液相质谱联用发展了一种(图1)同时检测7种甾醇激素的分析方法。我们利用甲基叔丁基醚(MTBE)来提取卵泡液中的激素,然后用合成的吉拉德P试剂(GP)和氘代的吉拉德P试剂(d5-GP)来标记卵泡液中的甾醇激素和甾醇激素标品。其中d5-GP标记的标品作为内标。由于GP试剂含有一个永久带电的季铵基团,提高了质谱离子化效率,使得甾醇激素的检测灵敏度提高了4-504倍。本文方法的定量限为0.03-0.2 nM,表现出较高的灵敏度。多囊卵巢综合症是一种激素紊乱疾病,影响着6.6-8%育龄期的妇女。利用本文发展的方法,我们分析了多囊卵巢综合症病人的卵泡液。与正常人比较,多囊卵巢综合症病人的卵泡液中雄烯二酮和睾酮的含量显著升高,而孕烯醇酮的含量显著降低。这与文献报道的结果一致[2]。该方法还可用于其他生物样品的激素分析。
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